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生物样品透射电镜简易制样步骤

发布日期:2012-07-21 浏览数:438

一.取材:

组织块小于1立方毫米

二.固定:      

2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。

用0.1M磷酸漂洗液漂洗         15分 三次

1%锇酸固定液固定                2-3小时

用0.1M磷酸漂洗液漂洗         15分 三次

三.脱水:      

50%乙醇                        15-20分

70%乙醇                        15-20分

90%乙醇                        15-20分

90%乙醇 90%丙酮(1:1)        15-20分

90%丙酮                        15-20分

以上在4度冰箱内进行

100%丙酮         室温         15-20分三次

四.包埋:      

纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4小时

纯丙酮+包埋液(1:2)室温 过夜

纯包埋液                 37度 2-3小时

五.固化:      

37度烘箱内                 过夜

45度烘箱内                 12小时

60度烘箱内                 24小时

六.超薄切片机切片 50-60 nm

七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色

八.透射电镜观察


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